本发明提供了一种基于电化学生物传感器检测大肠杆菌的方法。本研究将纳米技术、生物技术与电化学传感分析技术三者有机结合，首先制备了石墨烯、金纳米粒子、EDOT的复合物，修饰于电极上，进行条件的优化后，在最佳条件下进行后续的检测，将抗原1先修饰于电极上，然后将不同浓度的大肠杆菌100℃灭活后也修饰于电极上，最后将HRP标记的抗原2修饰于电极上，我们发现该传感器检测到的电流和大肠杆菌浓度之间存在线性的对应关系，从而实现了大肠杆菌的检测。我们发现，基于此方法制备的电化学生物传感器具有选择性强，灵敏度高，操作简单快速等优点。