本发明公开了一种双功能标记物构建的免疫传感器的制备方法及其应用，属于新型纳米功能材料与生物传感器技术领域。其特征在于：(1)铜掺杂二氧化钛Cu@TiO2的制备；(2)双功能标记物-二抗孵化物Cu@TiO2-Ab2的制备；(3)双功能标记物构建的免疫传感器的制备及分析应用。本发明双功能标记物构建的免疫传感器优点在于识别快速、灵敏度高、检测限低、成本低、便于操作，能实现多种肿瘤标志物的高灵敏、特异性、快速准确检测。