本发明提供了一种检测17β-雌二醇的电化学免疫传感器。该免疫传感器利用电极表面修饰技术，将制备的氧化石墨烯-聚苯胺复合物(GO-PANI)修饰电极表面，然后通过电聚合的方法在电极表面聚合一层铂金合金(Au-PtNPs)，再修饰17β-雌二醇完全抗原在电极表面，同时修饰抗体复合物(PDA-PtNPs-AuNPs-Ab-HRP)和17β-雌二醇标准品在电极表面，这样其完全抗原和标准品同时竞争结合抗体复合物上的抗体，结合在电极表面的抗体复合物上的HRP催化底物H2O2产生信号，这样通过添加底物H2O2前后的信号变化和标准品浓度之前的关系绘制工作曲线，达到检测17β-雌二醇的目的。本文发明的PDA-PtNPs-AuNPs纳米材料是第一次合成，且GO-PANI复合物导电性能强，Au-PtNPs纳米合金具有良好的生物相容性，对H2O2具有一定的催化性能。电化学免疫传感器具有灵敏度高，检测速度快的优点，检测周期短。便于实际样品的快速检测。