本发明公开了一种负载型普鲁士蓝电化学生物传感器标记物的制备方法,涉及纳米科学、生物免疫技术、电化学传感等领域。本发明利用银纳米颗粒和普鲁士蓝优异的催化性能,制备了银纳米颗粒掺杂的负载普鲁士蓝的聚多巴胺纳米复合物作为电化学生物传感器标记物。通过负载银纳米颗粒的聚多巴胺纳米微球进行修饰,实现了生物分子的固定。银纳米颗粒和普鲁士蓝对过氧化氢底液的协同催化作用进一步提高了对过氧化氢的催化能力。普鲁士蓝不仅是过氧化氢最有利的还原电催化剂,且具有优异的储存稳定性。该标记物可以适用于多种电化学生物传感器的制备,在科研和临床中具有广泛的应用前景。