本发明提供一种表面键合单层荧光分子凝胶玻璃的制备方法及应用。其特征在于以下步骤:(1)使用溶胶凝胶法以正硅酸乙酯(TEOS)和氨基硅烷共同作为硅源合成氨基功能化二氧化硅微球,在洗涤干净后将其充分分散在无水乙醇中,然后置于烘箱中固化形成表面氨基化凝胶玻璃;(2)以柠檬酸为原料通过酰氯法合成柠檬酰氯;(3)玻璃表面的氨基与酰氯发生反应连接在一起合成表面键合单层荧光分子的凝胶玻璃,将其置于烘箱中加热稳定。本发明方法所制备的表面键合单荧光分子的凝胶玻璃均匀透明,具有良好的热稳定性且易于加工成型,适合工业生产,可以应用于铁离子的定性检测,在光伏电池或照明领域里也具有广阔的应用前景。