本发明提供了一种检测谷胱甘肽、组氨酸的方法,其包括如下步骤:制备Cu2+‑硫胺素体系,取一份进行孵育后,测量荧光光谱,得到荧光强度F0;另取一份相同质量的Cu2+‑硫胺素体系,加入已知浓度的谷胱甘肽,混匀后,在与步骤S1相同的条件下孵育相同的时间后,测量荧光光谱,得到荧光强度F;以谷胱甘肽的浓度为横坐标,(F0‑F)/F0作为纵坐标进行曲线的绘制,得到谷胱甘肽的浓度和(F0‑F)/F0的关系方程;将待测谷胱甘肽的样品进行测量荧光光谱,得到荧光强度F’,将所述F’带入已得到的谷胱甘肽的浓度和(F0‑F)/F0的关系方程中,计算得到待测样品中谷胱甘肽的浓度。本发明具有如下的有益效果:检测体系无需制备纳米材料,只需将几种试剂简单混合,操作简单省时。