本发明提供了一种基于核酸适配体检测卡那霉素的生物传感器，包括金电极，由内到外依次修饰在金电极上的HAP2层和HAP1‑aptamer‑primer层；HAP2层的厚度为15 ±2 nm，HAP1‑aptamer‑primer层的厚度为10 ±2 nm。所述HAP1‑aptamer‑primer层中HAP1(摩尔)、aptamer(摩尔)、primer(摩尔)、ExoIII(活性)的摩尔与活性的比为1 : 1 : 1 : 250。本发明的生物传感器的电极简便、小型化、易携带、可多次使用；反应条件温和，速度快，操作简便；制备方法简单，工艺成本低，性能稳定，电极的重复性好。
