本发明提供一种血红素溶液浓度的检测方法，属于生物检测领域。本发明使用硫胺素代替鲁米诺，成本低且较为环保，荧光信号较为稳定，提高了检测结果的重现性，青蒿素在血红素存在时，分解产生超氧自由基，硫胺素本身没有荧光，在超氧自由基存在时，氧化生成有荧光性质的硫色素，利用荧光光谱法检测血红素浓度，相比化学发光法检测，重现性较好。实施例的数据表明，本发明提供的检测方法对300nmol/L的血红素进行了6次重复测定，相对标准偏差为6.8％。