本发明涉及生物传感器技术领域,特别涉及基于DNA三股螺旋结构引发滚环扩增超灵敏检测MicroRNA的荧光生物传感器。为了解决检测MicroRNA的方法中特异性和灵敏度都比较低,且成本高的问题。本发明提供了一种基于基于DNA三股螺旋结构引发滚环扩增超灵敏检测MicroRNA生物传感器,将DNA聚合酶phi29,切刻内切酶Nt.Bbvcl的辅助靶标回收,以及滚环扩增,实现荧光信号循环放大作用;制备方法包括:THSS的合成、环形探针的构建、荧光检测实现信号放大的作用;本申请制备的荧光生物传感器可实现定量检测MicroRNA。