本发明涉及一种近红外及双光子双模式成像荧光探针的制备及应用，属于化学生物学技术领域。本发明的近红外及双光子双模式成像荧光探针是以尼罗红衍生物和生物素为原料合成的，是一种棕色产物。本发明的荧光探针，具有良好的光谱性质，分别用540nm和590nm作为激发波长，在660nm处出现最大发射波长，且荧光强度较高。本发明的荧光探针，还对肿瘤细胞有靶向作用，是一种靶向近红外荧光探针；一方面在不破坏组织样品的前提下能够实现实时检测体内信号；另一方面能够提高信号在肿瘤内的富集，提高信噪比。本发明的荧光探针既可以进行近红外成像，同时也能够进行双光子成像，两种模式相互验证，能提高结果的准确性。
