本发明公开了一种电致化学发光生物传感器标记物的制备方法及应用,涉及纳米科学、生物免疫技术、电化学传感等领域。本发明利用金纳米颗粒和多孔石墨相氮化碳纳米片优异的催化性能,制备了金纳米颗粒负载的多孔石墨相氮化碳纳米片,通过氨基封端的聚乙二醇进行修饰,实现了发光试剂鲁米诺和生物分子的固定。纳米复合物对共反应试剂良好的催化性能极大提升了发光试剂的发光效率。多臂聚乙二醇不但提高了发光试剂和生物分子的固定量,其抗蛋白性质降低了非特异性分子的吸附,提高了灵敏度。该标记物可以适用于多种电化学发光生物传感器的制备,在科研和临床中具有广泛的应用前景。