利用基因工程和基因合成的方法得到两种重组载体p2186和p1000。分别采用核酸发酵制备p2186 DNA载体,然后进行EcoRI完全酶切,进而获得摩尔数相当的2kb、1kb、800bp、600bp的DNA片混合物‑Mix1。以质粒p1000为PCR模板,以特异引物进行扩增,获得1000bp的PCR产物,用EcoRI进行部分(不完全)酶切,可获得5种 DNA片段混合物‑Mix2。Mix1和Mix2经过适当调配,可以组成条带分布均匀的200bp ladder DNA分子量标准, 其组成包括200bp、400bp、600bp、800bp、1000bp和2000bp,共6种双链DNA片段。本发明公开的两种200bp ladder制备用核酸载体p2186和p1000及其制备200bp ladder DNA分子量标准的方法,具有较大的技术及成本优势,不但效率高,省时省力,同时所得到的DNA分子量标准片段质量明显优于单一的载体酶切或PCR扩增来源的同类DNA 分子量标准。