本发明涉及生物传感器技术领域,特别涉及基于核酸适配体检测氨苄青霉素的生物传感器。为了解决以上现有技术中检测氨苄青霉素的方法特异性和灵敏度都比较低、成本高的问题。一种基于核酸适配体检测氨苄青霉素的生物传感器,在电极上依次修饰有捕获探针层、HAP和MB探针层。制备方法:对电极进行预处理;将捕获探针层修饰到电极表面;将HAP和MB探针层修饰到电极表面。利用了核酸适配体的特异型识别,利用氨苄青霉素的适体作为识别物质实现了对目标物氨苄青霉素的高特异性检测;利用聚合酶的聚合作用,实现了目标物的循环利用,起到了信号放大的作用。