本发明公开了一种用于分离小檗碱磁性多孔生物层析剂的制备方法,其特征在于,采用三(2‑羧乙基)膦和亚硫酸氢钠将脱脂羊毛溶解加入纳米四氧化三铁进行磁化,得到磁性多孔羊毛微球;采用三聚氰胺和醋酸铵对磁性多孔羊毛微球进行修饰,得到氨基化磁性多孔羊毛微球;在反应器中,按如下组成质量百分浓度加入,水:66~72%,甲酸:10~14%,葫芦〔7〕脲:6~10%,搅拌溶解,再加入氨基化磁性多孔羊毛微球:10~14%,于90±2℃恒温反应6h,固液分离,干燥,得到用于分离小檗碱磁性多孔生物层析剂。该吸附剂对小檗碱具有很高的吸附容量,具有很强的专一性和特异,成本低,机械强度高,可反复使用10次以上,吸附剂容易分离。