本发明涉及传感器技术领域,特别涉及一种检测大肠杆菌的电化学传感器,从内到外依次为电极、普鲁士蓝-碳纳米管-纳米金复合物层、大肠杆菌抗体层、牛血清白蛋白封闭层。制备方法:制备普鲁士蓝-碳纳米管-纳米金复合物,滴加到经过处理的电极表面,室温干燥,得到普鲁士蓝-碳纳米管-纳米金复合物层;在普鲁士蓝-碳纳米管-纳米金复合物层上滴加无标记的大肠杆菌抗体,干燥,得到大肠杆菌抗体层;在大肠杆菌抗体层外包覆牛血清白蛋白封闭层。制备方法简单,性能稳定,电极的重复性好,适用于食品安全中大肠杆菌的检测和生物传感器产业化的实际应用;可实现对食品中大肠杆菌的快速在线检测,检出限为3.4×10cfu?mL-1。