本发明公开了一种用于分离提纯芦丁植物纤维层析剂的制备方法,其特征在于,采用硫酸和高锰酸钾混合溶液对大豆蛋白纤维进行预处理;采用六次甲基二胺和碳酸铵对预处理大豆蛋白纤维进行氨基化;然后,在反应器中,按如下组成质量百分浓度加入,去离子水:74~77%,硫酸:10~14%,葫芦[8]脲:3~5%,搅拌溶解,再加入氨基化大豆蛋白纤维:8~10%,各组分之和为百分之百,于60±2℃恒温、搅拌、回流反应6h,冷却后,用去离子水洗涤至中性,固液分离,干燥,得到用于分离提纯芦丁植物纤维层析剂。该吸附剂对芦丁具有很高的吸附容量,具有专一性和特异,成本低,机械强度高,可反复使用10次以上,吸附剂容易分离。