本发明涉及一种基于核酸适配体薄膜的荧光传感器的制备方法,步骤如下:(1)用聚苯乙烯/聚乙二醇的甲苯溶液为母液,将核酸适配体、二(2-乙基己基)琥珀酸酯磺酸钠与母液混合,水浴20~40分钟,得成膜液;(2)将制得的成膜液于相对湿度为50%~80%的条件下,在固体基底上制备蜂窝状多孔薄膜;(3)将蜂窝状多孔薄膜从固体基底上剥离并置于荧光标记配对链溶液中,于3~5℃恒温条件下振荡孵化反应60~80分钟,然后用水冲洗3~5次,用氮气吹干,即得。本发明基于核酸适配体薄膜的荧光传感器的制备方法操作简单,成本低廉,尺度可控,解决了常规方法一般需要较昂贵的仪器设备、特殊的掩膜或印章材料的问题。